PCR实验室空调通风系统设计及压力控制
PCR实验室并没有严格的净化要求,但是为避免各个实验区域间交叉污染的可能性,宜采用全送全排的气流组织形式。同时,要严格控制送、排风的比例以保证各实验区的压力要求。
1、试剂贮存和准备区
该实验区主要负责贮存试剂的制备、试剂分装以及主反应混合液的制备。用于标本制作的试剂和材料应直接运送至本区,避免经过其他区域。试剂的原材料在此区域内贮存,并在此完成所需贮存试剂的制备工作。这样可以确保操作流程更加规范和安全。
对与气流压力的控制,本区并没有严格的要求。
2、标本制备区
在这个区域,主要操作包括临床标本的保存、核酸(如RNA和DNA)的提取与储存,以及将这些核酸加入扩增反应管中。在测定RNA时,还会进行cDNA的合成。 为了防止相邻区域的气溶胶污染,本区需要保持相对于邻近区域的正压环境。此外,由于加样过程中可能会产生气溶胶污染,因此应尽量减少本区域内的不必要走动,以降低污染风险。
3、扩增反应混合物配制和扩增区
该区域主要进行的操作为DNA或 cDNA扩增。此外,已制备的DNA模板和合成的 cDNA(来自样本制备区) 的加入和主反应混合液(来自试剂贮存和制备区) 制备成反应混合液等也可在本区内进行。
本区域需要保持相对于相邻区域的负压环境,以防止气溶胶外泄。为了减少气溶胶污染的风险,在该区域内应尽量减少不必要的走动。一些特定操作,例如加样等,应该在超净台中进行。
4、扩增产物分析区
该区域主要进行的操作为扩增片段的测定。如使用全自动封闭分析仪器检测,此区域可不设。
本区是主要的扩增产物污染来源,因此对本区的压力梯度的要求为:相对于邻近区域为负压,以避免扩增产物从本区扩散至其它区域。
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